
NIBSC 22/132 流感血凝素抗體血清標準品的產品分析
品牌:英國NIBSC標準品
CRM code(貨號):22/132
英文名稱:Influenza anti-B/Phuket/3073/2013-like (B Yamagata lineage) HA serum
描述:流感血凝素抗體血清標準品
產品用途:
使用適當的NIBSC抗原試劑制備流感抗血清試劑22/132,用于B/Phuket/3073/2013樣抗原的單次徑向擴散測定。
使用B/Phuket/3073/2013樣病毒的純化HA在綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797中制備抗血清試劑。HA抗原通過用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取,并通過在蔗糖梯度上沉淀純化(Brand,CN和Skehel,JJ,Nature,New Biology,1972,238145-147)。
生物材料原產國:英國。
綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797的免疫接種計劃如下:肌肉注射一劑約100微克的B/Phuket/3073/2013病毒HA和弗氏wan全佐劑(FCA),兩周后注射50微克的B/Puket/3073/2013,包括弗氏不wan全佐劑(FIA)。對于SH792、SH795和SH797,一周后再給予兩劑50微克劑量的B/Phuket/3073/2013 HA,包括FIA。對于SH793、SH794和SH796,一周后再給予三劑50微克劑量的B/Phuket/3073/2013 HA,包括FIA。初次免疫六周后,收集血清并加入 sodium azid(0.05%w/v)。
為了滅活口蹄疫病毒,抗血清通過維持pH 5.5(或更低)至少30分鐘進行處理,然后恢復到原始pH值。
將從綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797獲得的抗血清合并,用含有 sodium azid(0.05%w/v)的PBS緩沖液稀釋1:5,并裝入2ml體積的小瓶中。
材料的使用:
對于1ml中含有20-50微克HA活性的抗原的測定,應將約15-25ul的未稀釋試劑加入1ml瓊脂糖中。可能需要根據使用的B/Phuket/3073/2013類抗原標準或當地實驗室條件改變抗血清濃度。抗血清試劑22/132應按照Wood,JM,Schild,GC,Newman,RW和Seagroatt,VA描述的方法使用。生物標準化雜志,1977,5,2。

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